液相色谱作为一个既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离的仪器，具有灵活多样的特点，其应用范围已超过其他各种分离方法，尤其在中药样品的分析分离方面更为突出。而液相色谱在使用过程中容易出现一些问题，如果不对这些问题进行解决，就可能会影响分析结果，从而影响整个实验。因此，今天我们就来讨论一下液相色谱使用过程中可能会出现的问题。
在液相色谱使用过程中，比较常见的主要有柱压异常(包括过高或者过低)、峰形异常、基线漂移等。下面我们就来讨论一下这几个问题的原因和解决方法。
1、柱压异常
柱压异常包括过高与过低。柱压过高是常见的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。
2、峰形异常
1)所有峰均为负峰。解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。 2)所有峰均为宽峰。解决方法：系统未达到平衡；溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；色谱柱尺寸及类型选择不正确；色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；温度变化造成的影响。 3)色谱图中未出峰。解决方法：系统未进样或样品分解；泵未输液或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上情况成因作相应调整即可。 4)一个峰或几个峰是负峰。解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。 5)所出峰比预想的小。解决方法：样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确；定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。 6)出现双峰或肩峰。解决方法：进样量过大；样品浓度过高；保护柱或色谱柱柱头堵塞；保护拄或色谱柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道。 7)前伸峰。解决方法：进样量或样品浓度高；溶解样品的溶剂较流动相极性强；保护柱或色谱柱污染或失效。 8)拖尾峰。解决方法：柱超载，降低样品量；增加柱直径采用较高容量的固定相；峰干扰，对样品进行清洁过滤；调整流动相；硅羟基作用，加入三乙胺，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相pH值；柱内烧结不锈钢失效，更换烧结不锈钢；加在线过滤器，对样品进行过滤；死体积或柱外体积过大，将连接点降至最低；尽可能使用内径较细的连接管；柱效下降，更换柱子；采用保护柱，对柱子进行再生。 9)出现鬼峰。解决方法：进样阀残余峰，在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统；样品中存在未知物，改进样品的预处理；流动相污染，更换新流动相，尽可能现配现用，隔夜的流动相再次使用时要过滤；尽可能使用HPLC级试剂；流路中有小的气泡，打开Purge阀，加大流速排除。 10)出现平头峰。解决方法：检测器设置不正确；进样体积太大或样品浓度太高。
3、基线漂移
一般说来，机器刚起动时，基线容易漂移，大概要半个小时的平衡时间，如果你用了缓冲溶液或缓冲盐，还有就是在低波长下(220nm)平衡时间相对会比较长，但如果你在实验过程中发现基线漂移，则你要考虑下面的原因： 1)流通池被污染或有气体。解决方法：用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池(断开柱子更好)。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用盐酸)； 2)柱温波动。解决方法：控制好柱子和流动相的温度，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱； 3)紫外灯能量不足。解决方法：更换新的紫外灯； 4)检测器没有设定在最大吸收波长处。解决方法：将波长调整至最大吸收波长处； 5)流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。解决方法：检查流动相的组成，使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂； 6)样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。解决方法：使用保护柱，如有必要，在进样之间。在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子； 7)流动相的PH值没有调节好。解决方法：加适量的酸或碱调至合适PH值。
总的来说，在遇到问题时，需要按照排除法依次确定导致问题的原因，之后要做的就是修正和调整并且记录问题，只要做好这样的工作就不怕以后会出现问题。
液相色谱仪一直以来就备受广大实验室爱好者的宠爱，操作简单、、结果。今天我们就来具体介绍一下液相色谱仪常见的故障的解决方法，希望可以帮助用户更好的应用产品，希望可以帮助用户更好的应用产品。RXG检测VBA RXG检测VBA
(一)液相色谱仪保留时间变化RXG检测VBA RXG检测VBA
1.柱温变化柱恒温，必要时需配置恒温箱RXG检测VBA RXG检测VBA
2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱RXG检测VBA RXG检测VBA
3.缓冲液容量不够用〉25mmol/l的缓冲液RXG检测VBA RXG检测VBA
4.柱污染每天冲洗柱RXG检测VBA RXG检测VBA
5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相RXG检测VBA RXG检测VBA
6.柱快达到寿命采用保护柱RXG检测VBA RXG检测VBA
(二)液相色谱仪保留时间缩短RXG检测VBA RXG检测VBA
1.流速增加检查泵,重新设定流速RXG检测VBA RXG检测VBA
2.样品超载降低样品量RXG检测VBA RXG检测VBA
3.键合相流失流动相ph值保持在3~7.5检查柱的方向RXG检测VBA RXG检测VBA
4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀RXG检测VBA RXG检测VBA
5.温度增加柱恒温RXG检测VBA RXG检测VBA
(三)液相色谱仪保留时间延长RXG检测VBA RXG检测VBA
1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡RXG检测VBA RXG检测VBA
2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱RXG检测VBA RXG检测VBA
3.键合相流失同前(二)3RXG检测VBA RXG检测VBA
4.流动相组成变化同前(二)4RXG检测VBA RXG检测VBA
5.温度降低同前(二)5RXG检测VBA RXG检测VBA
(四)液相色谱仪出现肩峰或分叉RXG检测VBA RXG检测VBA
1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%RXG检测VBA RXG检测VBA
2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂RXG检测VBA RXG检测VBA
3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件RXG检测VBA RXG检测VBA
4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品RXG检测VBA RXG检测VBA
5.进样器损坏更换进样器转子RXG检测VBA RXG检测VBA
(五)液相色谱仪鬼峰RXG检测VBA RXG检测VBA
1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗RXG检测VBA RXG检测VBA
2.样品中未知物处理样品RXG检测VBA RXG检测VBA
3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)RXG检测VBA RXG检测VBA
4.三氟乙酸(tfa)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂RXG检测VBA RXG检测VBA
5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量，用hplc级的水RXG检测VBA RXG检测VBA
(六)液相色谱仪基线噪声RXG检测VBA RXG检测VBA
1.气泡(尖锐峰)流动相脱气,加柱后背压RXG检测VBA RXG检测VBA
2.污染(随机噪声)清洗柱,净化样品,用hplc级试剂RXG检测VBA RXG检测VBA
3.检测器灯连续噪声更换氘灯RXG检测VBA RXG检测VBA
4.电干扰(偶然噪声)采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)RXG检测VBA RXG检测VBA
5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压RXG检测VBA RXG检测VBA
(七)液相色谱仪峰拖尾RXG检测VBA RXG检测VBA
1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相RXG检测VBA RXG检测VBA
2.峰干扰清洁样品,调整流动相RXG检测VBA RXG检测VBA
3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相ph值,钝化样品RXG检测VBA RXG检测VBA
4.同前(四)4RXG检测VBA RXG检测VBA
5.同前(四)3RXG检测VBA RXG检测VBA
6.死体积或柱外体积过大连接点降至zui低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管RXG检测VBA RXG检测VBA
7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱RXG检测VBA RXG检测VBA
(八)液相色谱仪峰展宽RXG检测VBA RXG检测VBA
1.进样体积过大同RXG检测VBA RXG检测VBA
2.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散RXG检测VBA RXG检测VBA
3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点RXG检测VBA RXG检测VBA
4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣*峰半宽的10%RXG检测VBA RXG检测VBA
5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相RXG检测VBA RXG检测VBA
6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器RXG检测VBA RXG检测VBA
7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱RXG检测VBA RXG检测VBA
8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至zui小RXG检测VBA RXG检测VBA
9.样品过载进小浓度小体积样品RXG检测VBA 【客服微信qejc21】高效液相色谱仪分析中，选择流动相时应考虑流动相与填料的作用、纯度、与检测器的匹配、粘度、对样品的溶解度和样品回收等方面。1、流动相与填料的作用：流动相应 高效液相色谱仪分析中，选择流动相时应考虑流动相与填料的作用、纯度、与检测器的匹配、粘度、对样品的溶解度和样品回收等方面。RXG检测VBA RXG检测VBA RXG检测VBA
1、流动相与填料的作用：RXG检测VBA
流动相应不改变填料的任何性质。RXG检测VBA
低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩，从而改变色谱柱填床的性质。RXG检测VBA
碱性流动相不能用于硅胶柱系统。RXG检测VBA
酸性流动相不能用于氧化铝和氧化镁等吸附剂的柱系统。RXG检测VBA
2、纯度：RXG检测VBA
色谱柱的寿命与大量流动相通过有关，特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。RXG检测VBA
3、与检测器的匹配：RXG检测VBA
当使用UVD时，所用流动相在检测波长下应没有吸收或吸收很小。RXG检测VBA
当使用RID时，应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相，以提高灵敏度。RXG检测VBA
4、粘度：RXG检测VBA
高粘度溶剂会影响溶质的扩散和传质，使柱效降低，还会使柱压增加，分离时间延长。尽量选择沸点在100℃以下的流动相。RXG检测VBA
5、对样品的溶解度：如果溶解度欠佳，样品会在色谱柱内沉淀，不但影响纯化分离，而且会使色谱柱恶化。RXG检测VBA
6、样品回收：应选用挥发性溶剂。RXG检测VBA
高效液相色谱仪分析选择流动相时应注意的问题：RXG检测VBA
1.尽量使用高纯度溶剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。不纯的溶剂会引起基线不稳，产生伪峰。RXG检测VBA
2.避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降和损坏色谱柱，如使固定液溶解流失和酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。RXG检测VBA
3.样品在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱中沉积。RXG检测VBA
4.流动相粘度低（粘度适中）。若使用高粘度溶剂，会增高压力，不利于分离。常用低粘度溶剂有丙酮、甲醇和乙腈等。但粘度过低的溶剂也不宜采用，如戊烷等，它们容易在色谱柱和检测器内形成气泡，影响分离。RXG检测VBA
5.化学稳定性好。RXG检测VBA
6.流动相应满足检测器的要求。RXG检测VBA
对于紫外吸收检测器，应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长长。所谓溶剂的紫外截止波长是指当小于截止波长的辐射通过溶剂时，溶剂对此辐射产生强烈吸收，此时溶剂被看作是光学不透明的，会严重干扰组分的吸收测量。RXG检测VBA
对于示差折光检测器，要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相，以达到zui高灵敏度。RXG检测VBA
RXG检测VBA 液相色谱仪，看你分离的样品的种类，看流动相是否和样品互溶，分离程度，一般加水多少，甲醇，乙腈很多种，看样品的沸点，溶解性。RXG检测VBA RXG检测VBA 检测VBA-专业检测仪器服务平台,工程检测资料网,检测行业人才服务平台，工程行业信息服务平台。RXG检测VBA 相关热词：RXG检测VBA 等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。RXG检测VBA RXG检测VBA RXG检测VBA
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