薄层色谱法,是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。0Kp检测VBA
待点样、展开后,与适宜的对照物按同法所得的色谱图作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。0Kp检测VBA
薄层扫描仪是可以对斑点进行扫描的专用分光光度计,用可见光或紫外光作光源,线性扫描或锯齿扫描薄层板展开后的斑点;0Kp检测VBA
该斑点就吸收该组分特征波长的单色光,剩余的单色光经透射或反射或发射荧光,由检测器积分起来,获得这块斑点面积的待测物质含量。0Kp检测VBA
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。是近年来发展起来的一种微量、快速而简单的色谱法,它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。0Kp检测VBA
一方面适用于小量样品(几到几十微克,甚至0.01μg)的分离;另一方面若在制作薄层板时,把吸附层加厚,将样品点成一条线,则可分离多达500mg的样品。0Kp检测VBA
因此又可用来精制样品。故此法特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。0Kp检测VBA
此外,在进行化学反应时,常利用薄层色谱观察原料斑点的逐步消失来判断反应是否完成。0Kp检测VBA
薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂;0Kp检测VBA
带干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上;0Kp检测VBA
凉干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。0Kp检测VBA
待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。0Kp检测VBA
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高效液固吸附色谱仪分析的洗脱顺序
高效液固吸附色谱仪多为“正相色谱”,即固定相的极性大于流动相的极性。流动相的洗脱能力主要由其极性决定,极性强的流动相分子占据极性中心的能力强,洗脱能力强。流动相的选择要依据样品的极性和吸附剂的活性而定。吸附能力弱的组分先被洗脱,吸附能力强的组分后被洗脱。吸附能力的强弱与组分的极性、取代基的类型与数目、构型等性质有关。0Kp检测VBA
一、非极性组分吸附能力弱。0Kp检测VBA
二、基本母核相同,组分分子中取代基的极性越强或极性基团越多,分子极性越强(但要考虑其它因素的影响),则吸附能力越强。0Kp检测VBA
三、组分分子中双键数越多,则吸附能力越强。0Kp检测VBA
四、能形成分子内氢键的化合物,其吸附能力降低。0Kp检测VBA
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