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液相色谱仪管路阻塞的解决办法及工作原理

时间:2025-04-18 22:08:57  来源:  作者:

液相色谱仪管路阻塞的解决办法

  在使用高效液相的过程中,管路的堵塞是常发生的故障之一。下文为您介绍液相色谱管路堵塞的原因与解决方法。10e检测VBA

  液相色谱管路阻塞的原因:10e检测VBA

  1、没有很好过滤流动相;10e检测VBA

  2、样品中有微粒;10e检测VBA

  3、泵或进样器垫圈产生碎片;10e检测VBA

  4、预柱、护柱和分析柱中漏出填料;10e检测VBA

  5,毛刺和锉屑进入;10e检测VBA

  6、流动相中的结晶盐;10e检测VBA

  7、微生物10e检测VBA

  8、系统中进入了其它颗粒性物质。10e检测VBA

  液相色谱管路阻塞解决方法:10e检测VBA

  系统中管路阻塞的现象很少见,常见的是烧结过滤片(玻璃砂芯)阻塞。用烧结过滤器或过滤片(孔径2-10um)能去掉阻塞管路的微粒(如0、25mm管径)。用系统分段法检查阻塞的管路,从后向前分别松开接头检查,找到阻塞管路后,应立即拆下来疏导或换新。10e检测VBA

  如果是非刚性物质阻塞,如生物样品中的生化物质(蛋白质)、微生物等,可用极细的金属丝导通,也可以在火头上烧一烧,使有机物炭化,而后再导通。10e检测VBA

  如果是刚性物质阻塞,要导通则十分困难,采用反冲的办法有时能成功。就是将管子调头用泵冲洗。操作时要注意保护眼睛和裸露的皮肤,因阻塞物会以很高的速度冲出来。无法导通的管路要换上同样规格的管子。如果换上新管后又被阻塞,则应该停机检查上面提到的引起阻塞的几种原因。10e检测VBA

标签: 液相色谱仪
液相色谱仪液相色谱仪管路阻塞的解决办法_液相色谱仪

液相色谱仪原理与应用

    液相色谱仪的应用,可用于高沸点、热稳定性差以及具有生理活性物质的分析。一般来说,沸点在450℃以下,相对分子质量小于450的有机物可用液相色谱仪分析,但这些物质只占有机物的15%~20%,其余的80%~85%有机物原则上都可采用高效液相色谱仪分析。10e检测VBA


    色谱柱的使用和维护,色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。10e检测VBA

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    在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。调节流速太快,避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。10e检测VBA


    反冲色谱柱,一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效,预柱和保护柱,选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。10e检测VBA


    有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。10e检测VBA


    避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。10e检测VBA


    液相色谱仪的基本结构,由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。10e检测VBA


    工作原理,利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解、分配或吸附等化学作用性能的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。10e检测VBA


    从液相色谱仪工作流程中看到,色谱柱是实现分离的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。10e检测VBA


    色谱填料:经过制备处理后,用于填充色谱柱的物质颗粒,通常是5-10粒径的球形颗粒。10e检测VBA


    色谱柱管:内部抛光的不锈钢管。典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm,长250mm。10e检测VBA


    色谱柱:也称固定相,是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的,色谱柱的填充,干法填充:在硬台面上铺上软垫,将空柱管上端打开垂直放在软垫上,用漏斗每次灌入50-100mg填料,然后垂直台面墩10-20次。10e检测VBA


    湿法填充:又称淤浆填充法,使用专门的填充装置。10e检测VBA

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标签: 液相色谱仪
液相色谱仪液相色谱仪原理与应用_液相色谱仪

关于液相色谱仪的选择

    液相色谱仪是一种常见的色谱分析方法,与气相色谱相比液相色谱可以在常温中操作,且不受样品挥发度和热稳定性的限制。这使得液相色谱非常适合相对分子量较大,难汽化,不易挥发或对热敏感的物质、离子型化合物和高聚物的分离分析。10e检测VBA

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液相.jpg10e检测VBA


    然而要选购一台品质优良的液相色谱并不容易。液相色谱仪的指标很多,有关于泵的、关于检测器的、关于色谱柱的……不过,从选购角度考虑,可以优先考虑噪音、漂移、最小检测浓度、定性定量重复性等主要技术指标。当然,这些指标都要放在系统、回路里去看去比较。10e检测VBA


    1.噪音10e检测VBA


    噪音指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉冲以及其他非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动产生的声音。噪音的大小直接关系到仪器的检测灵敏度,噪音越大检测的灵敏度就越低。对于检测低含量的样品就要求仪器的噪音越小越好,否则噪音过大将会导致基线不稳,甚至影响分析结果;10e检测VBA


    2.最小检测浓度(最小检测限)10e检测VBA


    最小检测浓度是反映仪器灵敏度的重要参数。根据公式CL=2×Nd×C/H(CL:最小检测浓度 Nd:噪音 C:样品浓度最小检测浓度 H:样品峰高),最小检测浓度是和噪音成正比的,噪音越大,最小检测浓度就越大,灵敏度就越低。如果选购的仪器回避了这个指标,说明他们不愿在最小检测浓度的基础上去比较噪音;10e检测VBA


    3.漂移10e检测VBA


    漂移是指仪器稳定后一段时间内基线漂离原点的距离,通常用来衡量仪器稳定快慢。高品质的仪器能在较短的时间内达到稳定,从而在一定程度上提高分析效率;10e检测VBA


    4.定性定量重复性10e检测VBA


    主要是考核仪器稳定性的指标,这对于分析样品来说是非常重要的。好的仪器其稳定性应该是十分不错的,这就要求多次进样保留时间及含量的一致性,这样做出来的结果才能使人信服。虽然这些指标都属于检测器,但是就像前面所说的,条件是要放在整个回路和系统里去看去比较。10e检测VBA


    例如:泵的脉动会直接影响噪音指标、泵的流量准确度指标,以及密封性不好也会影响相关指标。所以要系统地看指标才可以反应出仪器的一些真实水平。10e检测VBA


    在选择仪器的时候需要充分考虑到仪器的方方面面才能拿到自己满意的机器。10e检测VBA


    首先从常规的几个部件做个简单的分析。10e检测VBA


    (一)输液泵应具备如下性能:10e检测VBA


    ① RSD(流量稳定性)<0.3%;10e检测VBA


    ② 流量范围宽, 0.1~5.0ml/min内连续可调,有的实验则需要更大流量;10e检测VBA


    ③ 输出压一般应能达到150~400 kg/cm2,流量越大,最高压力越低;10e检测VBA


    ④ 液缸容积小,有助于减少流动相死体积,利于清洗。10e检测VBA


    ⑤ 密封性能好,耐腐蚀。10e检测VBA


    (二)检测器10e检测VBA


    ①紫外检测器,分为可变单波长检测器VWD和二极管阵列检测器DAD,可以检测有紫外吸收的物质10e检测VBA


    ②荧光检测器,检测有荧光的物质10e检测VBA


    ③视差折光检测器,通用型检测器,但对环境要求极为苛刻,而且灵敏度低10e检测VBA


    ④ELSD,蒸发光散射检测器10e检测VBA


    ⑤MSD,质谱检测器10e检测VBA


    常用的是紫外检测,然后是MSD和ELSD10e检测VBA


    (三)色谱柱10e检测VBA


    要求柱效高、选择性好,分析速度快等。目前市场上销售的用于HPLC的各种微粒填料如多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、氧化铝、多孔碳等,其粒度一般为3,5,7,10μm等,柱效理论值可达5~16万/米。10e检测VBA


    一般的分析只需5000塔板数的柱效;同系物分析500即可;难分离物则可用2万的柱子。10e检测VBA


    因此一般10~30cm左右的柱长基本能满足复杂混合物分析的需要。所以要根据自己实际情况来选择合适的柱子。10e检测VBA


    柱效受柱内外因素影响,为使色谱柱达到较佳效率,除柱外死体积要小外,还要有合理的柱结构(尽可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使可以的装填技术,在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的,靠近管壁的部位比较疏松,易产生沟流,流速较快,影响冲洗剂的流形,使谱带加宽,这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起30倍粒径的厚度。在一般的液相色谱系统中,柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。10e检测VBA


    此外,温度在色谱分析中是个不容忽视的环境条件,环境温度对溶剂的溶解能力、色谱柱的性能、流动相的粘度都有影响。而且不同的检测器对温度的敏感度不一样。保持恒定的温度对实验而言是个绝对不容忽视的条件,因此也要留意注温箱的选择。以保证实验结果的准确性。10e检测VBA


    (四)进样器10e检测VBA


    进样装置要求:密封性好,重复性好,死体积小,保证中心进样,进样时对色谱系统的压力、流量影响小。而且进样方式多种多样,可分为隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。自动进样器则是市场发展的趋势。10e检测VBA


    (五)数据处理系统10e检测VBA


    一般专业的液相色谱仪生产厂家都有自己配套的液相色谱仪控制软件。但有不少液相色谱仪可以使用通用型的色谱数据工作站进行数据计算处理。进口软件价格比较高,这个自己得根据资金选择了。10e检测VBA


    二元泵和四元泵的区别二元有两个泵,泵后混合,气体的溶解度随压力的增大而增大,所以二元高压混合不会产生气泡。四元只一个泵(另外一个是辅泵),是泵前混合,在常压下进行的,两种液体混合时,会降低气体在混合溶液中的溶解度,通常会有气泡产生,所以四元低压梯度系统一定要配在线真空脱气机10e检测VBA

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