1、流动相Kbk检测VBA
在以水溶液为流动相时,水溶液中的微生物例如细菌容易生长,当用水溶液或有机酸缓冲液保护柱子时,一些霉菌可能在色谱柱中滋生,堵塞固定相颗粒间的空隙。由于湿法填充技术的问世,目前普遍使用的色谱柱填料直径一般都小于10um,流动相中的颗粒杂质很容易先沉积在柱头然后慢慢堵塞柱子。流动相的pH值对色谱柱也有影响,特别是对化学键合硅胶填料,水溶液的pH最适范围在2~7.5之间,当pH>8时,硅胶会释出生成絮状物堵塞柱子,且难以复原,柱效很快降低,甚至完全失效。当在缓冲液中加入有机溶剂例如甲醇或乙腈时,盐类的溶解度下降,会析出盐沉淀,堵塞柱子。同时流动相中的有机溶剂和盐会腐蚀色谱柱头的筛板,产生柱头凹陷。流动相的极性对柱子也有一定影响,对于硅胶柱,甲醇、水、冰乙酸等极性较大物质会破坏填料,反之,对于化学键合硅胶,极性小的物质如正丁醇、二氯甲烷等也起同样的作用。碱性溶液会破坏阳离子交换树脂色谱柱,而酸性溶液容易损坏阴离子交换树脂柱。Kbk检测VBA
2、样品和固定相Kbk检测VBA
如果有少量或微量的样品不能够溶解在流动相中,在通过固定相会堵塞柱子。样品中的颗粒杂质也会堵塞柱子。样品组分例如糖、蛋白质等通过柱子时会产生不可逆吸附,这样固定相的活性点被覆盖。样品组分还会与固定相产生反应,尤其是对于氨基柱的影响较为严重,因为氨基易与酐、酮形成希夫(Schiff)缩合而减少活性点,使保留时间缩短。色谱柱键合相基团脱落、固定相分解和活性基团变性以及会影响柱效和保留时间的显著改变。大多数键合相都是通过硅氧硅键(Si-O-Si)连接在硅基质上,形成带有有机基团的固定相Si-O-Si-R(R为CnH2n+1),硅氧硅键可能在水溶液中水解而断裂,使键合基团脱落。Kbk检测VBA
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色谱柱色谱柱使用寿命的因素_色谱柱
色谱柱种类介绍
色谱柱是色谱仪器中重要组成部分之一,它是分离不可缺少的一部分。因此不同的样品分类,用到不同的色谱柱。Kbk检测VBA
色谱柱可简单分为以下几类:Kbk检测VBA
a、根据分离方式分为:Kbk检测VBA
(1)正相色谱柱:SIL--磷脂、NH--糖、维生素E,CN--甾类激素。Kbk检测VBA
(2)反相色谱柱:ODS(C18)、(C8CNTMSPheny1)低分子量化合物。Kbk检测VBA
(3)离子交换色谱柱等。Kbk检测VBA
b、根据所有的担体材料分为三种:Kbk检测VBA
(1)硅胶型:机械强度高,易制成小颗粒,理论塔板数高。Kbk检测VBA
(2)聚合物型:在广泛的PH值范围内稳定。Kbk检测VBA
(3)羟基磷灰石型:对蛋白质等生物高分子样品有特殊的选择性。Kbk检测VBA
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