高效液相色谱仪分析中,选择流动相时应考虑流动相与填料的作用、纯度、与检测器的匹配、粘度、对样品的溶解度和样品回收等方面。2Rn检测VBA
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1、流动相与填料的作用:2Rn检测VBA
流动相应不改变填料的任何性质。2Rn检测VBA
低交联度的离子交换树脂和排阻色谱填料有时遇到某些有机相会溶胀或收缩,从而改变色谱柱填床的性质。2Rn检测VBA
碱性流动相不能用于硅胶柱系统。2Rn检测VBA
酸性流动相不能用于氧化铝和氧化镁等吸附剂的柱系统。2Rn检测VBA
2、纯度:2Rn检测VBA
色谱柱的寿命与大量流动相通过有关,特别是当溶剂所含杂质在柱上积累时。2Rn检测VBA
3、与检测器的匹配:2Rn检测VBA
当使用UVD时,所用流动相在检测波长下应没有吸收或吸收很小。2Rn检测VBA
当使用RID时,应选择折光系数与样品差别较大的溶剂作流动相,以提高灵敏度。2Rn检测VBA
4、粘度:2Rn检测VBA
高粘度溶剂会影响溶质的扩散和传质,使柱效降低,还会使柱压增加,分离时间延长。尽量选择沸点在100℃以下的流动相。2Rn检测VBA
5、对样品的溶解度:如果溶解度欠佳,样品会在色谱柱内沉淀,不但影响纯化分离,而且会使色谱柱恶化。2Rn检测VBA
6、样品回收:应选用挥发性溶剂。2Rn检测VBA
高效液相色谱仪分析选择流动相时应注意的问题:2Rn检测VBA
1.尽量使用高纯度溶剂作流动相,防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。不纯的溶剂会引起基线不稳,产生伪峰。2Rn检测VBA
2.避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降和损坏色谱柱,如使固定液溶解流失和酸性溶剂破坏氧化铝固定相等。2Rn检测VBA
3.样品在流动相中应有适宜的溶解度,防止产生沉淀并在柱中沉积。2Rn检测VBA
4.流动相粘度低(粘度适中)。若使用高粘度溶剂,会增高压力,不利于分离。常用低粘度溶剂有丙酮、甲醇和乙腈等。但粘度过低的溶剂也不宜采用,如戊烷等,它们容易在色谱柱和检测器内形成气泡,影响分离。2Rn检测VBA
5.化学稳定性好。2Rn检测VBA
6.流动相应满足检测器的要求。2Rn检测VBA
对于紫外吸收检测器,应注意选用检测器波长比溶剂的紫外截止波长长。所谓溶剂的紫外截止波长是指当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,此时溶剂被看作是光学不透明的,会严重干扰组分的吸收测量。2Rn检测VBA
对于示差折光检测器,要求选择与组分折光率有较大差别的溶剂作流动相,以达到zui高灵敏度。2Rn检测VBA
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液相色谱仪,看你分离的样品的种类,看流动相是否和样品互溶,分离程度,一般加水多少,甲醇,乙腈很多种,看样品的沸点,溶解性。2Rn检测VBA
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高效液相色谱仪在五大领域中的应用
高效液相色谱仪是利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解、分配或吸附等化学作用性能的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。高效液相色谱仪在食品分析、环境分析、生命科学、医学检验和无机分析等领域得到广泛使用。一般来说,80%~85%的有机物原则上可采用高效液相色谱仪分析。2Rn检测VBA
一、在食品分析中:2Rn检测VBA
1、食品营养成分分析:蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸(邻苯二甲酸、柠檬酸和苹果酸等)、有机胺和矿物质等分析。2Rn检测VBA
2、食品添加剂分析:甜味剂、防腐剂、着色剂(柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄和亮蓝等)和抗氧化剂等分析。2Rn检测VBA
3、食品污染物分析:霉菌毒素(黄qu霉毒素、黄杆菌毒素和大肠杆菌毒素等)、微量元素和多环芳烃等分析。2Rn检测VBA
二、在环境分析中:2Rn检测VBA
多环芳烃(特别是稠环芳烃)和农药残留(氨基甲酸脂类,反相色谱)等分析。2Rn检测VBA
三、在生命科学中的应用:2Rn检测VBA
1、低分子量物质:氨基酸、有机酸、有机胺、类固醇、卟啉、糖类和维生素等分析。2Rn检测VBA
2、高分子量物质:多肽、核糖核酸、酶(胰岛素、激素、细胞色素和干扰素等)和蛋白质等分析。2Rn检测VBA
四、在医学检验中:2Rn检测VBA
1、合成药物:抗生素、抗忧郁药物和黄胺类药等分析。2Rn检测VBA
2、天然药物生物碱:吲哚碱、颠茄碱和强心甙等分析。2Rn检测VBA
五、在无机分析中:2Rn检测VBA
阳、阴离子等分析。2Rn检测VBA
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