液相色谱仪一直以来就备受广大实验室爱好者的宠爱,操作简单、、结果。今天我们就来具体介绍一下液相色谱仪常见的故障的解决方法,希望可以帮助用户更好的应用产品,希望可以帮助用户更好的应用产品。Vgh检测VBA
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(一)液相色谱仪保留时间变化Vgh检测VBA
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1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱Vgh检测VBA
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2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱Vgh检测VBA
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3.缓冲液容量不够用〉25mmol/l的缓冲液Vgh检测VBA
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4.柱污染每天冲洗柱Vgh检测VBA
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5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相Vgh检测VBA
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6.柱快达到寿命采用保护柱Vgh检测VBA
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(二)液相色谱仪保留时间缩短Vgh检测VBA
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1.流速增加检查泵,重新设定流速Vgh检测VBA
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2.样品超载降低样品量Vgh检测VBA
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3.键合相流失流动相ph值保持在3~7.5检查柱的方向Vgh检测VBA
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4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀Vgh检测VBA
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5.温度增加柱恒温Vgh检测VBA
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(三)液相色谱仪保留时间延长Vgh检测VBA
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1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡Vgh检测VBA
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2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱Vgh检测VBA
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3.键合相流失同前(二)3Vgh检测VBA
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4.流动相组成变化同前(二)4Vgh检测VBA
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5.温度降低同前(二)5Vgh检测VBA
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(四)液相色谱仪出现肩峰或分叉Vgh检测VBA
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1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于*峰的15%Vgh检测VBA
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2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂Vgh检测VBA
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3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件Vgh检测VBA
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4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品Vgh检测VBA
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5.进样器损坏更换进样器转子Vgh检测VBA
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(五)液相色谱仪鬼峰Vgh检测VBA
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1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗Vgh检测VBA
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2.样品中未知物处理样品Vgh检测VBA
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3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)Vgh检测VBA
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4.三氟乙酸(tfa)氧化(肽谱)每天新配,用抗氧化剂Vgh检测VBA
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5.水污染(反相)通过变化平衡时间检查水质量,用hplc级的水Vgh检测VBA
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(六)液相色谱仪基线噪声Vgh检测VBA
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1.气泡(尖锐峰)流动相脱气,加柱后背压Vgh检测VBA
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2.污染(随机噪声)清洗柱,净化样品,用hplc级试剂Vgh检测VBA
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3.检测器灯连续噪声更换氘灯Vgh检测VBA
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4.电干扰(偶然噪声)采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)Vgh检测VBA
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5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压Vgh检测VBA
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(七)液相色谱仪峰拖尾Vgh检测VBA
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1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相Vgh检测VBA
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2.峰干扰清洁样品,调整流动相Vgh检测VBA
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3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相ph值,钝化样品Vgh检测VBA
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4.同前(四)4Vgh检测VBA
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5.同前(四)3Vgh检测VBA
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6.死体积或柱外体积过大连接点降至zui低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管Vgh检测VBA
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7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱Vgh检测VBA
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(八)液相色谱仪峰展宽Vgh检测VBA
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1.进样体积过大同Vgh检测VBA
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2.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散Vgh检测VBA
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3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点Vgh检测VBA
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4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣*峰半宽的10%Vgh检测VBA
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5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相Vgh检测VBA
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6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器Vgh检测VBA
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7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱Vgh检测VBA
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8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至zui小Vgh检测VBA
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9.样品过载进小浓度小体积样品Vgh检测VBA
高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱,也可以拓展为制备系统,采用高压混合器连接两个高压恒流泵,利用RS232通讯,即可实现梯度分析;Vgh检测VBA
便于用户自由选择与搭配,混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成,用途广泛;Vgh检测VBA
可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。Vgh检测VBA
高效液相色谱仪分离原理:液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。Vgh检测VBA
流动相与固定相之间应互不相溶(极性不同,避免固定液流失),有一个明显的分界面。Vgh检测VBA
当试样进入色谱柱,溶质在两相间进行分配。达到平衡时,高效液相色谱仪报价,服从于高效液相色谱计算公式;Vgh检测VBA
6种定量计算方法:归一法、修正归一法、带比例因子的修正归一法、内标法、外标法,高效液相色谱仪适用范围,以及指数计算法。Vgh检测VBA
高效液相色谱仪特点:Vgh检测VBA
1、梯度洗脱内部软件可自控制,编辑、存贮60个梯度方法,运行复杂的梯度程序;Vgh检测VBA
2、泵形式:串联双柱塞 浮动式密封圈;泵头自冲洗功能,泵无须手动排空即可输液“自吸式单向阀”技术,可延长密封圈使用寿命;Vgh检测VBA
3、光路系统采用精密定位结构和独特的散热技术,高效的光学系统和数字过滤;Vgh检测VBA
4、程序化的溶剂类和压缩因子,可自动补偿;完整的预清洗功能,更于快速溶剂更换;Vgh检测VBA
5、波长调节功能:既可由键盘面板控制也可由程序软件设定,全封闭集成型光电检测元件,无需任何机械部分调整即可选择或改变波长;Vgh检测VBA
6、光源运行时间在线监测并显示,方便用户确定光源寿命;Vgh检测VBA
7、三条流量校正曲线以及特有的多点参数校正,保障了极高的流量准确性;Vgh检测VBA
8、梯度:高压2-3元;梯度方式:高压,梯度洗脱内部软件可自控制,可通过PC机及泵控制;Vgh检测VBA
9、实时显示样品池和参比池能量,方便判断光源和流通池状态;Vgh检测VBA
10、紫外检测器具有自动波长定位调整,自动调零,多量程输出选择;Vgh检测VBA
11、智能化高,可实现网络化平台监控,提高了你的QC效益;Vgh检测VBA
12、自动化,让你从繁锁的分析操作中解放出更多的时间。Vgh检测VBA
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高效液相色谱仪高效液相色谱仪的原理特点_高效液相色谱仪
液相色谱柱日常使用和维护
色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。Vgh检测VBA
①避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓(如前所述)。Vgh检测VBA
②应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。Vgh检测VBA
③一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。Vgh检测VBA
④选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。Vgh检测VBA
⑤避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。Vgh检测VBA
⑥经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。Vgh检测VBA
⑦保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过晚上或更长时间。Vgh检测VBA
⑧色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。Vgh检测VBA
在后两种情况发生时,小心拧开柱接头,用洁净小钢将柱头填料取出1~2mm高度(注意把被污染填料取净)再把柱内填料整平。然后用适当溶剂湿润的固定相(与柱内相同)填满色谱柱,压平,再拧紧柱接头。这样处理后柱效能得到改善,但是很难恢复到新柱的水平。Vgh检测VBA
柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱(5~30mm),可以起到保护、延长柱寿命的作用。采用保护柱会损失一定的柱效,这是值得的。Vgh检测VBA
通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上。以硅胶为基质的填料,只能在pH2~9范围内使用。柱子使用一段时间后,可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶,特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷,使柱效下降,这时也可补加填料使柱效恢复。Vgh检测VBA
每次工作完后,可以用洗脱能力强的洗脱液冲洗,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触。装在HPLC仪上柱子如不经常使用,应每隔4~5天开机冲洗15分钟。Vgh检测VBA
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