分光光度计的组成与操作应用光度计常见问题解决方法

时间：2025-04-16 16:17:12 来源：作者：

【客服微信qejc21】分光光度计所采用的分光光度法在定量分析领域中的应用已有数十年的历史,至今仍是实验室中常用的分析方法之一。随着现代科学仪器的不断发展,在传统的追求准确

分光光度计所采用的分光光度法在定量分析领域中的应用已有数十年的历史,至今仍是实验室中常用的分析方法之一。随着现代科学仪器的不断发展,在传统的追求准确、快速、可靠的同时,小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代可见分光光度计新的增长点。Rrz检测VBA

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结构组成Rrz检测VBA

分光光度计的基本组成和大多数分光光度计一样,都是由光源、单色器、比色池、光电检测器和放大器几部分组成。Rrz检测VBA

1.光源Rrz检测VBA

分光光度计的可见区的光源仍是采用卤素钨灯和氘灯。卤素钨灯的工作波长范围为:320～2500nm,氘灯的工作波长范围为180～375nm。两光源有仪器上的一个灯选择反射镜自动进行选择和光源切换。Rrz检测VBA

1.2单色器(分光系统)Rrz检测VBA

单色器是分光光度计的重要部分,比滤光片选择波长能更有效地提供带宽窄的单色光。是采用先进的光栅单色器,由入射狭缝、出口狭缝、色散元件、准直镜等光学元件组成。入射狭缝是用来调节入射单色光的纯度和强度，也直接影响分辨率。而准直镜(反射凹面镜)的作用一是将入射光束变为平行光束后再进入色散元件，二是把来自色散元件的平行光束聚焦于出口狭缝上,形成光谱像。出口狭缝是单色光的出口，它只让光谱带中所需要波长的光从狭缝中透出，而将其他波长的光挡住,不让其通过。Rrz检测VBA

色散元件是单色器中的核心元件，起着将复合光分解为单色光的作用。分光光度计的色散元件是凹面反射式全息光栅,它本身就起着分解复合光和准直镜(聚焦)的作用,而且全息光栅具有杂散光小、不产生伪线和分辨率高的优点。Rrz检测VBA

1.3比色池Rrz检测VBA

分光光度计配有多种规格样品池架和比色杯。池架有标准池架、七位池架、50霯微量池架和多形态样品池架。比色杯有常量(2～4mL)、半微量(0.5～1mL)和微量(50～100霯),使用方便。另外还配有样品架卡套,分为特为酶动力学设计的半导体温控池:温度范围15～50℃,和流动池。Rrz检测VBA

正确使用分光光度计Rrz检测VBA

分光光度计操作简便。Rrz检测VBA

打开仪器电源开关，仪器应顺利通过自检，然后预热10分钟左右，可以进行测定。读数时应记录最先显示的数值，不要让样品连续光照时间太长(动力学测定除外)，特别是在紫外区域测定时更要快速，因为随着光的连续照射读数会下降，变得不稳定。而应用显色剂显色后会使读数稳定，给测定带来方便，同时还会使物质中许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到数十万，明显提高了检测灵敏度。Rrz检测VBA

作为一种分子吸收光谱仪,广泛应用于化学研究、生物医药、环境科学和食品分析等研究领域。它具有分析精度高、应用范围广、分析简便快速和仪器灵敏度较高的优点,是目前大多数实验室常用的定量分析仪器。Rrz检测VBA

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　　紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。

　　色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池，紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度，将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种：按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计；按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计；按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。

　　仪器电源接通后，光源不亮。

　　原因：

　　①光源灯泡已损坏。

　　②保险管烧坏。

　　处理方法：

　　①更换氘灯或钨灯。

　　②更换保险管。

　　紫外可见分光光度计噪音较大。

　　原因：

　　光源灯泡使用时间超过寿命期。

　　处理方法：

　　更换光源灯泡。

　　自检时提示波长自检出错。

　　原因：

　　自检过程中可能打开过仪器样品室的盖子。

　　处理方法：

　　关上仪器样品室盖子，重新自检。

　　仪器自检时提示通讯错误。

　　原因：

　　仪器与电脑之间的数据线没有连接好。

　　处理方法：

　　连接好数据线，重新打开仪器和软件，重新自检。

　　仪器零点飘忽不定，主要反映在简易仪器上。

　　原因：

　　在简易仪器中，零点往往是通过电位器来调整，这种电位器一般是炭膜电阻制作的，使用久了往往造成接触不良。

　　处理方法：

　　更换电位器。

　　在使用过程中，出现数字显示不能归零，同时伴有图线记录基线位置偏高。

　　原因：

　　①光电倍增等老化，性能降低。

　　②信号处理板可能发生故障。

　　③前置放大版出现故障，引起反馈量增大

　　处理方法：

　　①开机通电，先做记录故障曲线，再与原始记录的标准曲线对照，找出异同点，并作一下定性定能分析。然后用一只同型号规格的新光电倍增管替换机上的光电管，再开机实验，结果记录出来的图线并没有什么变化，由此证明光电倍增管没有老化变质。

　　②进一步检查信号处理板，未发现信号处理板各元器件损坏，对影响灵敏度有关的电位器检测，结果测得数据正常，这说明信号处理板没有故障。

　　测试过程中提示能量太低。

　　原因：

　　①光源灯泡使用时间超过寿命期。

　　②样池中有不透光的东西挡住了光。

　　处理方法：

　　①更换光源灯。

　　②拿走挡光的物品。

　　吸光值结果出现负值（常见）。

　　原因：

　　没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液。

　　处理方法：

　　做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液。

　　当仪器波长固定在某个波长下时，吸光值信号上下摆动，特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器。

　　原因：

　　开关触点因长期氧化所致造成接触不良。

　　处理方法：

　　用金属活化剂清洗按键触点即可。

　　样品信号重现性不良

　　原因：

　　排除紫外可见分光光度计本身的原因外，大的可能是样品溶液不均匀所致，在简易的单光束仪器中，样品池架一般为推拉式的，有时重复推拉不在同一个位置上。

　　处理方法：

　　①采取正确的试样配置手段。

　　②修理推拉式样品架的定位碰珠。

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