液相色谱仪流动相的选择原则 液相色谱常见问题解决方法

　　现代液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择中。但是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。8El检测VBA
 

　　硅胶基质填料:8El检测VBA
 

　　1、正相色谱8El检测VBA
 

　　正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)，以及其他具有极性官能团，如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN，CPS)的键合相填料。8El检测VBA
 

　　由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强落的组份zui先被冲洗出色谱柱。8El检测VBA
 

　　正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷(Hexane),氯(Chloroform)二氯甲烷(Methylence Chloride)等。8El检测VBA
 

　　2、反相色谱8El检测VBA
 

　　反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对教弱的官能团的键合相。8El检测VBA
 

　　反相色谱所使用的流动相极性教强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。8El检测VBA
 

　　样品流出色谱柱的顺序是极性教强组合zui先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。8El检测VBA
 

　　常用的反相填料有C18(ODS) C8(MOS)。C4(B)C6H5(Phenyl)等。8El检测VBA
 

　　聚合物填料：8El检测VBA
 

　　聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等，其主要优点是在PG值为1-14均可使用。8El检测VBA
 

　　相对与硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的淑水性；大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。8El检测VBA
 

　　现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效教低。8El检测VBA
 

　　其他无机填料8El检测VBA
 

　　其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质，一般于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相，石墨化碳的表面即是保留的基础，不再需其它的表面改性，该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强，石墨化碳可用于分离某些几何导构体，又由于HPLC流动相中不会被溶解，这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC，氧化铝微粒刚性强，可制成稳定的色谱柱柱床，其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强，应用范围受到一定的限制，所以未能广泛应用，新型氧化诰填料也可用于 HPLC，商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化诰微球色谱柱，应用PH范围1~14，温度可达到1000C。由于氧化诰填料几年才开始研究，加之前的实验难度，其重要用途与优势尚在进行中。8El检测VBA
 

　　怎样选择填料粒度8El检测VBA
 

　　目前，商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售，而目前分析分离主要用3,5和10um填料，填料的粒度主要影响填充柱的两个参数，即柱效和背压。粒度越小，填充柱的柱效越高；小于3um的填料应用，在相同选择性条件下，提高柱效可提高分离度，但不是*的因素。如果固定相选择是真确，但是分离度不够，那么选择更小粒度的填料是很用有的，3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5UM填料的柱效提高近30%；然而；3um的色相谱的背压却是5um的2倍。与此同时，柱效提高意味着在相同条件下可以选择更短的色谱柱，以缩短分析时间，另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使用温度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色谱柱的压力。8El检测VBA
 

　　如何保证良好的柱性能与柱寿命8El检测VBA
 

　　认证阅读色谱柱使用说明书8El检测VBA
 

　　使用填充良好的色谱柱8El检测VBA
 

　　尽量减少压力波动，避免机械及热冲击8El检测VBA
 

　　使用保护柱及在线过滤器8El检测VBA
 

　　经常以强溶剂冲洗色谱柱8El检测VBA
 

　　充分过滤样品及流动相，尽量避免杂质微粒与保强留分成8El检测VBA
 

　　用稳定的固定相(C18zui稳定)8El检测VBA
 

　　在中等PH纸操作(6~8)，用有机年成液溶8El检测VBA
 

　　色谱柱使用温度小于400C8El检测VBA
 

　　硅胶基质的的色谱柱，应保持流动相的PH值范围在3.0~8.08El检测VBA
 

　　在水流动相与缓冲浓液中加200ppm的叠氮钠8El检测VBA
 

　　流动相中含有缓冲溶液，应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡，有机溶剂不能低于5%8El检测VBA
 

　　过夜或储存时，冲洗掉盐和缓冲液，用纯有机溶剂流动相保存(乙晴)

　　【中国检测VBA 使用手册】众所周知，液质联用法是质谱领域的一种技术创新，它具有灵敏度高、通量性能好、优异的高流量性能、降低的离子抑制效应、自清洁离子源探针设计和可靠的接口设计，分析速度快、使用简便等特点。广泛应用于环保、农业、检疫、食品安全等方面的快速分析测试，完全可以胜任农作物、畜禽产品、奶制品及相关加工食品中大批量样品日常法规检测项目分析测试，如食品中农药残留、兽药残留、真菌毒素、添加剂、营养强化剂及有机污染物等项目，8El检测VBA
 

　　目前，在多项食品补充检测方法中均使用液相色谱-串联质谱作为测定法。如食药总局发布《食用油脂中辣椒素的测定》食品补充检验方法、《饮料、茶叶及相关制品中对乙酰氨基酚等59种化合物的测定》、《饮料、茶叶及相关制品中二氟尼柳等18种化合物的测定》等测定方法均采用了液相色谱-串联质谱测定方法。8El检测VBA
 

　　近日，市场监管总局发布《食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的测定》、《饮料中γ-丁内酯及其相关物质的测定》2项食品补充检验方法。根据公告内容，本次发布的2项检验方法均为液相色谱-串联质谱测定法。8El检测VBA
 

　　其中，《食品中吗啡、可待因、罂粟碱、那可丁和蒂巴因的测定》涉及的测定仪器还包括液相色谱-三重四极杆串联质谱仪：带电喷雾离子源(ESI)；分析天平：感量为0.00001 g；分析天平：感量为0.01 g；离心机：转速≥4 000 r/min；超声波清洗器：功率为800W；涡旋混合器；匀浆机；粉碎机。8El检测VBA
 

　　《饮料中γ-丁内酯及其相关物质的测定》测定的仪器包含液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾(ESI)离子源；分析天平：感量分别为0.01 mg和0.1 mg；涡旋振荡器；离心机：转速≥6000 r/min。8El检测VBA
 

　　目前不少食品药品检验检测机构和部门当中都会配备很多设备，气相色谱仪、液相色谱仪以及各种联用仪器设备都不罕见。随着联用技术的不断发展和扩充，未来这批仪器设备将综合色谱、质谱等多项先进技术的优势，在定量和定性分析能力上有所提升。如果食品药品检验检测国家重点实验室能够落实，我国检测技术攻关将更有效率，国内食品药品安全和质量也能得到更好的技术保障。