液相色谱作为一个既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离的仪器，具有灵活多样的特点，其应用范围已超过其他各种分离方法，尤其在中药样品的分析分离方面更为突出。而液相色谱在使用过程中容易出现一些问题，如果不对这些问题进行解决，就可能会影响分析结果，从而影响整个实验。因此，今天我们就来讨论一下液相色谱使用过程中可能会出现的问题。
在液相色谱使用过程中，比较常见的主要有柱压异常(包括过高或者过低)、峰形异常、基线漂移等。下面我们就来讨论一下这几个问题的原因和解决方法。
1、柱压异常
柱压异常包括过高与过低。柱压过高是常见的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。
2、峰形异常
1)所有峰均为负峰。解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。
2)所有峰均为宽峰。解决方法：系统未达到平衡；溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；色谱柱尺寸及类型选择不正确；色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；温度变化造成的影响。
3)色谱图中未出峰。解决方法：系统未进样或样品分解；泵未输液或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上情况成因作相应调整即可。
4)一个峰或几个峰是负峰。解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。
5)所出峰比预想的小。解决方法：样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确；定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。
6)出现双峰或肩峰。解决方法：进样量过大；样品浓度过高；保护柱或色谱柱柱头堵塞；保护拄或色谱柱污染或失效；柱塌陷或形成短通道。
7)前伸峰。解决方法：进样量或样品浓度高；溶解样品的溶剂较流动相极性强；保护柱或色谱柱污染或失效。
8)拖尾峰。解决方法：柱超载，降低样品量；增加柱直径采用较高容量的固定相；峰干扰，对样品进行清洁过滤；调整流动相；硅羟基作用，加入三乙胺，用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相pH值；柱内烧结不锈钢失效，更换烧结不锈钢；加在线过滤器，对样品进行过滤；死体积或柱外体积过大，将连接点降至最低；尽可能使用内径较细的连接管；柱效下降，更换柱子；采用保护柱，对柱子进行再生。
9)出现鬼峰。解决方法：进样阀残余峰，在每次进完样后用充足的时间来平衡和清洗系统；样品中存在未知物，改进样品的预处理；流动相污染，更换新流动相，尽可能现配现用，隔夜的流动相再次使用时要过滤；尽可能使用HPLC级试剂；流路中有小的气泡，打开Purge阀，加大流速排除。
10)出现平头峰。解决方法：检测器设置不正确；进样体积太大或样品浓度太高。
3、基线漂移
一般说来，机器刚起动时，基线容易漂移，大概要半个小时的平衡时间，如果你用了缓冲溶液或缓冲盐，还有就是在低波长下(220nm)平衡时间相对会比较长，但如果你在实验过程中发现基线漂移，则你要考虑下面的原因：
1)流通池被污染或有气体。解决方法：用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通池(断开柱子更好)。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用盐酸)；
2)柱温波动。解决方法：控制好柱子和流动相的温度，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱；
3)紫外灯能量不足。解决方法：更换新的紫外灯；
4)检测器没有设定在最大吸收波长处。解决方法：将波长调整至最大吸收波长处；
5)流动相污染、变质或由低品质溶剂配成。解决方法：检查流动相的组成，使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂；
6)样品中有强保留的物质(高K’值)以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。解决方法：使用保护柱，如有必要，在进样之间。在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子；
7)流动相的PH值没有调节好。解决方法：加适量的酸或碱调至合适PH值。
总的来说，在遇到问题时，需要按照排除法依次确定导致问题的原因，之后要做的就是修正和调整并且记录问题，只要做好这样的工作就不怕以后会出现问题。
一、简介HnC检测VBA
HnC检测VBA
HnC检测VBA
在我们平常的工作当中，液相色谱柱的正确使用和维护十分重要，液相色谱柱使用是否得当，直接影响液相色谱柱的寿命，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。HnC检测VBA
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二、液相色谱柱的使用和维护规程HnC检测VBA
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在液相色谱操作过程中，我们需要下面的问题，方便维护液相色谱柱。HnC检测VBA
Ａ柱子在装卸、更换时，动作要轻，接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动，以免柱床产生空隙。HnC检测VBA
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Ｂ.如果仪器用来做常规分析，样品种类有限，但分析次数多，则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱，这样有助于延长柱子的寿命。 HnC检测VBA
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Ｃ.避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使液相色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。HnC检测VBA
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Ｄ.应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。HnC检测VBA
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Ｅ.如使用柱温控制装置时，应注意在通人流动相后才能升温。HnC检测VBA
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Ｆ.一般说来液相色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。HnC检测VBA
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Ｇ.选择使用适宜的流动相，以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。HnC检测VBA
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Ｈ.避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。HnC检测VBA
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Ｉ.经常用强溶剂冲洗液相色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50-75mL。HnC检测VBA
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Ｊ.保存液相色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。HnC检测VBA
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Ｋ.液相色谱柱使用过程中，如果压力升高，一种可能是烧结滤片被堵塞，这时应更换滤片或将其取出进行清洗；另一种可能是大分子进人柱内，使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形，则可能柱头出现塌陷，死体积增大。HnC检测VBA
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Ｌ.在完成分离分析工作之后，不能马上就关机，需及时对色谱分析系统进行冲洗，一般0.5h以上，以除去液相色谱柱内的杂质。HnC检测VBA
下面为大家推荐一款成都摩尔科学仪器有限公司提供的赛分GP-C18色谱柱，如有需要欢迎搜索成都摩尔科学仪器有限公司HnC检测VBA
通用的C18反向色谱柱。HnC检测VBA
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反相色谱GP-C18描述：HnC检测VBA
GP-C18以全覆盖的键合硅胶为填料，具有优异的稳定性。独特的单官能团化学键合技术可避免形成复合的C18分子层。均匀的涂层确保了固定相具有高选择性和率的分离特点。HnC检测VBA
| 硅胶： | 球形, 高纯度(金属杂质<10ppm) |
| 孔径： | 120Å |
| 粒径： | 1.8、2.2、3、4、5、7和10µm |
| 孔体积： | 1.0mL/g |
| 比表面积： | 300m²/g |
| 固定相结构; | 单层全封尾 |
| 碳载量： | 17% |
反相色谱GP-C18特点：HnC检测VBA
● 采用高度可控的单分子层形成和封尾技术 HnC检测VBA
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● 高的柱间重现性 HnC检测VBA
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● 高的选择性和分离效率HnC检测VBA
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● 适合分离酸性、中性和碱性化合物，以及许多药物和多肽等 HnC检测VBA
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● 推荐使用有机溶剂或有机溶剂/水体系的流动相HnC检测VBA |
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柱稳定性HnC检测VBA
GP-C18以全覆盖的硅胶为填料，因此具有优异的稳定性。下图显示了苯胺、苯甲醚和甲苯在运行13,000倍柱体积流动相（85%甲醇:水=85:15, v/v）后保留时间依然高度重现。Sepax GP-C18的这种稳定性使其非常适合于各种分析物的确认。HnC检测VBA
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GP-C18固定相所采用的单层官能团化学键合技术可避免形成复合的C18分子层。具备这种均匀涂层的固定相具有高选择性和率的分离特点。图2是在4.6mm I.D.×250mm Sepax GP-C18柱上进行测试得到的色谱图。HnC检测VBA
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订购信息：HnC检测VBA
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色谱柱HnC检测VBA
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长度x内径HnC检测VBA | 粒径（µm）HnC检测VBA | 孔径(Å)HnC检测VBA | 订货号HnC检测VBA |
30 mm x 2.1 mmHnC检测VBA
50 mm x 2.1 mmHnC检测VBA | 3HnC检测VBA
3HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101183-2103HnC检测VBA
101183-2105HnC检测VBA |
100 mm x 4.6 mmHnC检测VBA
150 mm x 4.6 mmHnC检测VBA
250 mm x 4.6 mmHnC检测VBA | 3HnC检测VBA
3HnC检测VBA
3HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101183-4610HnC检测VBA
101183-4615HnC检测VBA
101183-4625HnC检测VBA |
30 mm x 2.1 mmHnC检测VBA
50 mm x 2.1 mmHnC检测VBA | 5HnC检测VBA
5HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101185-2103HnC检测VBA
101185-2105HnC检测VBA |
100 mm x 4.6 mmHnC检测VBA
150 mm x 4.6 mmHnC检测VBA
250 mm x 4.6 mmHnC检测VBA | 5HnC检测VBA
5HnC检测VBA
5HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101185-4610HnC检测VBA
101185-4615HnC检测VBA
101185-4625HnC检测VBA |
150 mm x 10.0 mmHnC检测VBA
250 mm x 10.0 mmHnC检测VBA | 5HnC检测VBA
5HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101185-10015HnC检测VBA
101185-10025HnC检测VBA |
150 mm x 21.2 mmHnC检测VBA
250 mm x 21.2 mmHnC检测VBA | 5HnC检测VBA
5HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101185-21215HnC检测VBA
101185-21225HnC检测VBA |
150 mm x 30.0 mmHnC检测VBA
250 mm x 30.0 mmHnC检测VBA | 5HnC检测VBA
5HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101185-30015HnC检测VBA
101185-30025HnC检测VBA |
150 mm x 10.0 mmHnC检测VBA
250 mm x 10.0 mmHnC检测VBA | 10HnC检测VBA
10HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101189-10015HnC检测VBA
101189-10025HnC检测VBA |
150 mm x 21.2 mmHnC检测VBA
250 mm x 21.2 mmHnC检测VBA | 10HnC检测VBA
10HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101189-21215HnC检测VBA
101189-21225HnC检测VBA |
150 mm x 30.0 mmHnC检测VBA
250 mm x 30.0 mmHnC检测VBA | 10HnC检测VBA
10HnC检测VBA | 120HnC检测VBA
120HnC检测VBA | 101189-30015HnC检测VBA
101189-30025HnC检测VBA |
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HnC检测VBA
保护柱芯HnC检测VBA
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长度x内径HnC检测VBA | 粒径（µm） | 孔径(Å) | 包装HnC检测VBA | 订货号HnC检测VBA |
10mm x 2.0mmHnC检测VBA | 3 | 120 | 1/pkHnC检测VBA | 101183-2001HnC检测VBA |
| 10mm x 4.0mm | 3 | 120 | 1/pk | 101183-4001 |
| 10mm x 2.0mm | 5 | 120 | 1/pk | 101185-2001 |
| 10mm x 4.0mm | 5 | 120 | 1/pk | 101185-4001 |
| 10mm x 2.0mm | 3 | 120 | 2/pkHnC检测VBA | 101183-2001THnC检测VBA |
| 10mm x 4.0mm | 3 | 120 | 2/pk | 101183-4001T |
| 10mm x 2.0mm | 5 | 120 | 2/pk | 101185-2001T |
| 10mm x 4.0mm | 5 | 120 | 2/pk | 101185-4001T |
| 10mm x 2.0mm | 3 | 120 | 5/pk | 101183-2001F |
| 10mm x 4.0mm | 3 | 120 | 5/pk | 101183-4001FHnC检测VBA |
| 10mm x 2.0mm | 5 | 120 | 5/pk | 101185-2001F |
| 10mm x 4.0mm | 5 | 120 | 5/pk | 101185-4001F |
| 10mm x 21.2mm | 5 | 120 | 1/pk | 101185-21201 |
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HnC检测VBA
保护柱套装（订货号：GUARD-KIT）HnC检测VBA
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产品名称HnC检测VBA | 包装（规格）HnC检测VBA | 订货号HnC检测VBA |
分析型保护柱套HnC检测VBA | 10mm x2.0(4.0)mmHnC检测VBA | 102000-AHHnC检测VBA |
PEEK二接HnC检测VBA | 7cmHnC检测VBA | 102002-P355HnC检测VBA |
扳手HnC检测VBA | 2个HnC检测VBA | 102000-WRENCHHnC检测VBA |
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| 制备型保护柱套 | 10mm x21.2mm | 102000-21201 |
