分光光度计所采用的分光光度法在定量分析领域中的应用已有数十年的历史,至今仍是实验室中经常用的分析方法之一。随着现代科学仪器的不断发展,在传统的追求准确、快速、可靠的同时,小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代可见分光光度计新的增长点。Yhn检测VBA
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结构组成Yhn检测VBA
分光光度计的基本组成和大多数分光光度计一样,都是由光源、单色器、比色池、光电检测器和放大器几部分组成。Yhn检测VBA
1.光源Yhn检测VBA
分光光度计的可见区的光源仍是采用卤素钨灯和氘灯。卤素钨灯的工作波长范围为:320~2500nm,氘灯的工作波长范围为180~375nm。两光源有仪器上的一个灯选择反射镜自动进行选择和光源切换。Yhn检测VBA
1.2单色器(分光系统)Yhn检测VBA
单色器是分光光度计的重要部分,比滤光片选择波长能更有效地提供带宽窄的单色光。是采用先进的光栅单色器,由入射狭缝、出口狭缝、色散元件、准直镜等光学元件组成。入射狭缝是用来调节入射单色光的纯度和强度,也直接影响分辨率。而准直镜(反射凹面镜)的作用一是将入射光束变为平行光束后再进入色散元件,二是把来自色散元件的平行光束聚焦于出口狭缝上,形成光谱像。出口狭缝是单色光的出口,它只让光谱带中所需要波长的光从狭缝中透出,而将其他波长的光挡住,不让其通过。Yhn检测VBA
色散元件是单色器中的核心元件,起着将复合光分解为单色光的作用。分光光度计的色散元件是凹面反射式全息光栅,它本身就起着分解复合光和准直镜(聚焦)的作用,而且全息光栅具有杂散光小、不产生伪线和分辨率高的优点。Yhn检测VBA
1.3比色池Yhn检测VBA
分光光度计配有多种规格样品池架和比色杯。池架有标准池架、七位池架、50霯微量池架和多形态样品池架。比色杯有常量(2~4mL)、半微量(0.5~1mL)和微量(50~100霯),使用方便。另外还配有样品架卡套,分为特为酶动力学设计的半导体温控池:温度范围15~50℃,和流动池。Yhn检测VBA
正确使用分光光度计Yhn检测VBA
分光光度计操作简便。Yhn检测VBA
打开仪器电源开关,仪器应顺利通过自检,然后预热10分钟左右,可以进行测定。读数时应记录最先显示的数值,不要让样品连续光照时间太长(动力学测定除外),特别是在紫外区域测定时更要快速,因为随着光的连续照射读数会下降,变得不稳定。而应用显色剂显色后会使读数稳定,给测定带来方便,同时还会使物质中许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到数十万,明显提高了检测灵敏度。Yhn检测VBA
作为一种分子吸收光谱仪,广泛应用于化学研究、生物医药、环境科学和食品分析等研究领域。它具有分析精度高、应用范围广、分析简便快速和仪器灵敏度较高的优点,是目前大多数实验室常用的定量分析仪器。Yhn检测VBA
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分光光度计分光光度计的组成与操作应用_分光光度计
分光光度计的基本工作原理
分光光度计计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。
分光光度计的基本工作原理
分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收光带,所以,当光色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系,即符合比尔定律。
T=I/Iolg(Io/I)=εcb
式中,T为透过率,Io为入射光强度,I为透射光强度,A为消光值(吸光度),ε为吸收系数,b为溶液的光径长度,c为溶液的浓度。从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时,透光率是根据溶液的浓度而变化的。Yhn检测VBA
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分光光度计分光光度计的基本工作原理_分光光度计
分光光度计的维护使用
在使用分光光度计时,我们必须要注意一些使用后的维护,保养,和一些基本使用注意事项,才能达到更好的使用效果。Yhn检测VBA
分光光度计的使用维护:Yhn检测VBA
1、使用的吸收池必须洁净,并注意配对使用。量瓶、移液吸管均应校正、洗净后使用。Yhn检测VBA
2、取吸收池时,手指应拿毛玻璃面的两侧,装盛样品以池体的4/5为度,使用挥发性溶液时应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净,晾干防尘保存。Yhn检测VBA
3、供试品溶液浓度除各该品种已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之间为宜。Yhn检测VBA
4、测定时除另有规定外,应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照,采用1cm石英吸收池,在规定的吸收峰±2nm以内,测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定,以核对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度最大的波长作为测定波长,除另有规定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。Yhn检测VBA
5、供试品应取2份,如为对照品比较法,对照品一般也应取2份。平行操作,每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。Yhn检测VBA
6、选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值会偏低,狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准,对于大部分被测品种,可以使用2nm缝宽。Yhn检测VBA
7、单色器是仪器的核心部分,装在密封盒内不能拆开,为防止色散元件受潮发霉,必须经常更换单色器盒干燥剂。Yhn检测VBA
8、光电转换元件不能长时间曝光,应避免强光照射或受潮积尘。Yhn检测VBA
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