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薄层色谱法实验展开剂不可浸过样品点 薄层色谱常见问题解决方法
时间:2025-04-15 22:24:00 来源: 作者:
根据原理,色谱法需要溶剂与固定相的相对流动,才能够通过不同组分“溶解、吸附平衡”的不同,使它们随溶剂的迁移速率不同(极性小溶解好的迁移快,极性大易于吸附的迁移慢),从而达成分离。
具体到TLC而言,溶剂靠硅胶板“虹吸作用”从溶剂液面起向上流动。这也就是说,被溶剂泡着的那部分板子上,溶剂实际上是同板子相对静止的,没有相对流动也就自然无法达到分离。
当然上面说的都是理想情况。很多时候,你点好的TLC板如果
样品
Rf值比较大,那在浸入了溶剂中的时候,溶剂就能使样品点扩散成一个扁椭圆并仍与溶剂面持平。而如果Rf值很小,浸没的又比较深,才可能发生我上面所说的只扩散、不分离的情况。有兴趣的话可以在TLC分析时,特地多放些展开剂试一试。
【
检测VBA
使用手册】
薄层色谱有好几种类型,实验时使用的器材也有不同的材料可以选择。使用薄层色谱进行分析时,需要根据目标物质选择合适的实验器材,才能更好地进行实验,保证结果准确。
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背衬板
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背衬板的材料一般有三种:玻璃、铝和塑料。玻璃板具有高耐化学性和良好的热稳定性,可重复使用,适用于炭化,是常用的背衬。但是非常容易破损,而且不能轻易切割成所需尺寸,厚度>1.0 mm比铝板或塑料背板要厚很多。
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铝箔板易于操作且抗破损,比玻璃板轻薄,可降低运输成本,节省仓储空间,还可以很容易地用剪刀剪成所需尺寸。铝箔板具有强吸附层附着力,适用于含有高浓度水的洗脱液。但是不能重复使用,而且对于诸如无机酸和浓氨的试剂而言,不如玻璃具有耐化学性。
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塑料或聚酯 (PET) 板背衬也轻便且灵活。与铝箔板一样,它们可以切割成所需尺寸并存储在实验室笔记本中以备将来参考。它们还具有很好的耐溶剂性能。但是塑料板热稳定性低,炭化必须在比玻璃更低的温度下进行,而且柔性吸附层可能更容易开裂。
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吸附层/基质
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硅胶:微酸性极性固定相,适用于酸性、中性物质分离。常见的薄层色谱吸附剂,不具有氧化铝的催化性能。
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氧化铝:碱性极性固定相,适用于碱性、中性物质分离
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纤维素:含有羟基的极性固定相,适用于分类亲水性物质。可以是微晶纤维素或纤维纤维素。当在微晶纤维素层上分离时,斑点通常比在纤维纤维素层上分离时更紧凑。
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聚酰胺:含有酰胺基极性固定相,适用于酚类、醇类化合物的分离。具有低扩散性,允许具有大强度的严格限制的样品点。不推荐使用腐蚀性显影试剂。
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粘合剂
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聚合物(有机)粘合剂:含有聚合物粘合剂的吸附层板通常坚固,使样品处理和应用更容易。它们还允许在显影溶剂中使用更高的水含量。适用于所有薄层色谱应用(使用炭化进行可视化的应用除外)。
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无机粘合剂:比没有粘合剂或石膏粘合剂的吸附层板更坚固,耐水的并且与水性显影剂相容。通常用于制备型薄层色谱板,对于需要炭化以便可视化的应用,或开发或可视化试剂与有机粘合剂相互作用时,推荐使用带有无机粘合剂的板。
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石膏:容易断裂,不建议将它们用于含有超过20%水的显影溶剂。但是允许含有目标分子的斑点容易地从洗脱和回收支持物上刮下,推荐用于需要炭化以便可视化的应用。
薄层色谱法的特点
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1、不需要而精密的气相色谱仪分析仪器,分析天平除外,设置和操作简单。
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2、与纸色谱分析法相比,优越于可以使用腐蚀性的显色剂。
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3、可选择的流动相和固定相范围比纸色谱法广泛。
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4、展开快速,且扩散的作用小,斑点比纸色谱集中,检出灵敏度比较高。技术上多样化,不仅有多中展开方式(例如,分布展开,连续展开,双向展开,浓度梯度展开等)对复杂的混合物进行分离,分析。
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5、适用于分离,分析少量样品。
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6、与气相色谱法相比,薄层色谱法适用于分离,气相色谱仪分析受热不稳定的难以挥发的样品,这点与液相色谱法及早期的液相柱色谱法相同。
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7、薄层色谱法和纸谱法都是手工操作,自动化程度较低,分离效果,和重现性都较差,分离复杂混合物由一定的困难。
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纸色谱只用于分离,然后用比色法定量。而气相色谱仪薄层色谱法分离后可直接测量斑点面积定量,或用滴定法、比色法定量。
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薄层色谱法点样时注意哪些问题
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用打孔器把滤纸制成直径2毫米的小园片,随后把小园片戳附在小号缝衣针的针尖上,其大头部分固定在软木塞上,用微量注射器吸取酒样和配制的标准溶液,缓慢地点加在小园滤纸片上,边点加边用吹风机以100℃以上的热风把点样吹干。在活化并经过冷却的薄层板上,用缝衣针的大头把硅胶薄层抠掉一小孔,直径略小于2毫米,在小孔中用少许淀粉浆糊,把点加的酒样或标准溶液的滤纸片粘附于小孔上。
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