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液相色谱仪的检定规程及技术交流

时间：2025-04-14 18:31:06 来源：作者：

1.适用范围e5X检测VBA

适用于岛津LC-10AD型液相色谱仪的检定。e5X检测VBA

2.职责e5X检测VBA

检验员：严格按照检定规程进行周期检定。e5X检测VBA

QC主管：监督检查检定规程执行情况。e5X检测VBA

3.检定项目和技术要求e5X检测VBA

3.1.输液系统e5X检测VBA

3.1.1.泵流量设定值误差：Ss＜±2%；流量稳定性误差：＜±2%e5X检测VBA

3.1.2.定性测量重复性误差（5次定量管进样）：RSD≤1.5%e5X检测VBA

3.1.3.定量测量重复性误差（5次定量管进样）：RSD≤1.5%e5X检测VBA

3.2.紫外检测器性能e5X检测VBA

3.2.1.可调波长紫外—可见光检测器波长示值误差：＜±2nm；重复性误差：＜±1nme5X检测VBA

3.2.2.基线漂移：≤5×10^-3（AU/h）；基线噪声：≤5×10^-4(AU)e5X检测VBA

3.2.3.zui小检定浓度（静态）：4×10^-8g/ml（萘的甲醇溶液）e5X检测VBA

4.检定条件e5X检测VBA

流量设定值（ml/min）e5X检测VBA		0.5e5X检测VBA	1.0e5X检测VBA	1.5e5X检测VBA
测量次数e5X检测VBA		3e5X检测VBA	3e5X检测VBA	3e5X检测VBA
收集流动相时间（min）e5X检测VBA		25e5X检测VBA	15e5X检测VBA	10e5X检测VBA
允许e5X检测VBA 误差e5X检测VBA	Sse5X检测VBA	3%e5X检测VBA	2%e5X检测VBA	2%e5X检测VBA
允许e5X检测VBA 误差e5X检测VBA	S_Re5X检测VBA	3%e5X检测VBA	2%e5X检测VBA	2%e5X检测VBA

4.1.环境温度为10～30℃，8小时内温度波动不超过±3℃，相对湿度低于65%。e5X检测VBA

4.2.电源电压：220±22V，电源频率：50±0.5Hz。e5X检测VBA

4.3.检定设备e5X检测VBA

4.3.1.秒表：分度值小于0.1s。e5X检测VBA

4.3.2.分析天平：zui大称量200g，zui小分度值0.1mg。e5X检测VBA

4.3.3.容量瓶e5X检测VBA

4.3.4.微量注射器e5X检测VBA

4.3.5.标准物质和试剂e5X检测VBA

5.检定方法e5X检测VBA

5.1.泵流量设定值误差Ss、流量稳定性误差S_R的检定。e5X检测VBA

将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器联接好，以甲醇为液动相，按表1设定流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先清洗称重过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地收集10～25分钟，称重，按下式计算Ss和S_R。e5X检测VBA

Ss=（Fm—Fs）/Fs×100%e5X检测VBA

S_R=（Fmax—Fmin）/F×100%e5X检测VBA

式中Ss为流量设定值误差（%）；e5X检测VBA

Fm=（W2—W1）ρt·t为流量实测值；e5X检测VBA

W2：容量瓶+流动相的重量（g）；e5X检测VBA

W1：容量瓶的重量（g）；e5X检测VBA

Fs：流量设定值（ml/min）；e5X检测VBA

ρt：实验温度下流动相的密度（g/cm³）；e5X检测VBA

t：收集流动相的时间（min）；e5X检测VBA

S_R：流量稳定性误差（%）；e5X检测VBA

Fmax：同一组测量中流量zui大值（ml/min）；e5X检测VBA

Fmin：同一组测量中流量zui小值（ml/min）；e5X检测VBA

F：同一组测量中的算术平均值（ml/min）。e5X检测VBA

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5.2.定性、定量测量重复性的检定e5X检测VBA

将仪器联接好，使之处于正常工作状态，用进样阀的定量管注入适当的标准溶液（萘或联苯）或稳定的待分析样品溶液，记录保留时间和峰面积，连续测量5次，按下式计算相对标准偏差RSD。e5X检测VBA

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5.3.紫外检测器性能e5X检测VBA
5.3.1.可调波长紫外-可见光检测器波长示值误差和重复性误差的检定e5X检测VBA
将检测器与记录仪联好，接通电源稳定后，先将检测波长调至235nm，用甲醇用流动相，流速1.0ml/min，用进样器注入重铬酸钾的硫酸溶液（取120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml，摇匀，即得）20ul，待出峰时立即停泵，改用波长扫描方式，得到重铬酸钾在紫外-可见光区的吸收曲线，记录其在235nm、257nm、313nm、350nm附近波长处的zui大或zui小吸收波长，分别找出各点zui大或zui小波长与标准波长之差即为波长示值误差；重复测定3次，各点zui小与zui大值之差即为波长重复性误差。e5X检测VBA
5.3.2.基线漂移和基线噪声的检定e5X检测VBA
将仪器各部分联接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇，流速为1.0ml/min，吸收度范围选择zui灵敏档，开机，待基线稳定后，记录基线30-40分钟，计算基线漂移和噪声。e5X检测VBA
5.3.3.zui小检测浓度e5X检测VBA
在静态条件下，用进样器注入4×10^-8g/ml萘的甲醇溶液，样品峰高应大于或等于两倍基e5X检测VBA

线噪声峰高，按下式计算zui小检测浓度。e5X检测VBA

C_l=2×H_N×C /He5X检测VBA

式中，C_l：zui小检测浓度（g/ml）；e5X检测VBA

H_N：噪声峰高（记录仪器数或实测高度cm）；e5X检测VBA

C：样品浓度（g/ml）；e5X检测VBA

H：样品峰高（记录仪器数或实测高度cm）。e5X检测VBA

6.检定结果处理和检定周期e5X检测VBA

6.1.检定结果全部项目均符合技术要求者，判为合格，方可使用。若个别部件、某一指标达不到要求，确难以维修而又不影响定性、定量结果准确性者，可作为准用品。e5X检测VBA

6.2.液相色谱仪的检定周期为两年，若更换部件或对仪器性能有怀疑时，应随时检定，并记录检定结果。e5X检测VBA

高效液相色谱应用总结

高效液相色谱是近年来发展起来的一种具有高灵敏度、高选择性的高效快速分离分析技术。它既能用于微量组分的分析测定，又能用于大量的制备分离，灵活多样。高效液相色谱仪系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

高效液相色谱仪的工作过程：e5X检测VBA

储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。以下是总结高效液相色谱仪的的应用：e5X检测VBA

1、在食品分析中的应用e5X检测VBA

食品营养成分分析：蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸（邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等）、有机胺、矿物质等；e5X检测VBA

食品添加剂分析：甜味剂、防腐剂、着色剂（合成色素如柠檬黄、苋菜红、靛蓝、胭脂红、日落黄、亮蓝等）、抗氧化剂等；e5X检测VBA

食品污染物分析：霉菌毒素（黄曲霉毒素、黄杆菌毒素、大肠杆菌毒素等）、微量元素、多环芳烃等。e5X检测VBA

2、在环境分析中的应用e5X检测VBA

多环芳烃（特别是稠环芳烃）、农药（如氨基甲酸脂类，反相色谱）残留等。e5X检测VBA

3、在生命科学中的应用e5X检测VBA

HPLC技术目前已成为生物化学家和医学家在分子水平上研究生命科学、遗传工程、临床化学、分子生物学等必不可少的工具。其在生化领域的应用主要集中于两个方面：e5X检测VBA

低分子量物质，如氨基酸、有机酸、有机胺、类固醇、卟啉、糖类、维生素等的分离和测定。e5X检测VBA

高分子量物质，如多肽、核糖核酸、蛋白质和酶（各种胰岛素、激素、细胞色素、干扰素等）的纯化、分离和测定。e5X检测VBA

4、在医学检验中的应用e5X检测VBA

体液中代谢物测定；药代动力学研究；临床药物监测：e5X检测VBA

合成药物：抗生素、抗忧郁药物（冬眠灵、氯丙咪嗪、安定、利眠宁、苯巴比妥等）、黄胺类药等。e5X检测VBA

天然药物生物碱（吲哚碱、颠茄碱、鸦片碱、强心甙）等e5X检测VBA

标签: 高效液相色谱

高效液相色谱高效液相色谱应用总结_高效液相色谱

高效液相色谱仪的原理特点

高效液相色谱仪可以完成二元高压梯度洗脱，也可以拓展为制备系统，采用高压混合器连接两个高压恒流泵，利用RS232通讯，即可实现梯度分析；e5X检测VBA

便于用户自由选择与搭配，混合器材主要由不锈钢、生物惰性PEEK等构成，用途广泛；e5X检测VBA

可广泛应用于研究开发、医药检验、食品检测、化工分析、环境监测等众多分析领域。e5X检测VBA

高效液相色谱仪分离原理：液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化学键合相色谱(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流动相和固定相都是液体。e5X检测VBA

流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。e5X检测VBA

当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行分配。达到平衡时，高效液相色谱仪报价，服从于高效液相色谱计算公式；e5X检测VBA

6种定量计算方法：归一法、修正归一法、带比例因子的修正归一法、内标法、外标法，高效液相色谱仪适用范围，以及指数计算法。e5X检测VBA

高效液相色谱仪特点：e5X检测VBA

1、梯度洗脱内部软件可自控制，编辑、存贮60个梯度方法，运行复杂的梯度程序；e5X检测VBA

2、泵形式：串联双柱塞浮动式密封圈；泵头自冲洗功能，泵无须手动排空即可输液“自吸式单向阀”技术，可延长密封圈使用寿命；e5X检测VBA

3、光路系统采用精密定位结构和独特的散热技术，高效的光学系统和数字过滤；e5X检测VBA

4、程序化的溶剂类和压缩因子，可自动补偿；完整的预清洗功能，更于快速溶剂更换；e5X检测VBA

5、波长调节功能：既可由键盘面板控制也可由程序软件设定，全封闭集成型光电检测元件，无需任何机械部分调整即可选择或改变波长；e5X检测VBA

6、光源运行时间在线监测并显示，方便用户确定光源寿命；e5X检测VBA

7、三条流量校正曲线以及特有的多点参数校正，保障了极高的流量准确性；e5X检测VBA

8、梯度：高压2-3元；梯度方式：高压，梯度洗脱内部软件可自控制，可通过PC机及泵控制；e5X检测VBA

9、实时显示样品池和参比池能量，方便判断光源和流通池状态；e5X检测VBA

10、紫外检测器具有自动波长定位调整，自动调零，多量程输出选择；e5X检测VBA

11、智能化高，可实现网络化平台监控，提高了你的QC效益；e5X检测VBA

12、自动化，让你从繁锁的分析操作中解放出更多的时间。e5X检测VBA

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