液相色谱柱、特别是高效液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是,只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。当然,目前大多数实验室多是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。但是在一些有特殊需要的情况下,或为节省经费,在实验室中自行填装高效液相色谱柱还是可取的。3lA检测VBA
液相色谱柱填装程序中应该注意的问题:3lA检测VBA
①高压操作的安全问题。常发生的问题是柱子与匀浆罐连接不牢,造成加压时柱头被高压冲下或柱子从匀浆罐上滑脱。此时,轻则填装失败,材料损失,重则造成人身伤害事故,一定要加以防范。除每次填装前均须仔细确认是否连接正确且牢靠外,可以还可加上由法兰盘和长螺杆组成的预防脱落装置,以防万一。3lA检测VBA
②通常,先填装的柱床较后填装的柱床紧密。因此,当使用时宜以相反的方向为宜,即让近匀浆罐一端作为使用时流动相的出口,而填装时的出口端则作为流动相的入口。3lA检测VBA
③新柱子使用前应以甲醇冲洗20-30min, 后,再改用流动相平衡。3lA检测VBA
④新柱子宜选适宜的标准样品进行评价并记录,以备存查和比较。3lA检测VBA
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液相色谱柱的日常维护保养
液相色谱柱是液相色谱仪的核心部件,且极易因使用不当而损坏,不互溶的流动相,不正确的保存方式及清洗都会降低色谱柱的使用寿命。因此液相色谱柱的日常维护保养极为重要。3lA检测VBA
1.流动方向已明确标明在色谱柱上,请正确安装色谱柱,除非您想冲洗色谱柱入口的污染物,否则,请不要反接色谱柱。3lA检测VBA
2.反相柱做完实验后,若使用流动相中含有缓冲溶液盐,请在使用完毕后用不含缓冲剂的80%水-有机溶剂流动相冲洗色谱柱,后换成100%有机溶剂贮存。3lA检测VBA
3.正相色谱柱正相使用保存在纯正己烷中,反相使用时需要将柱内贮存液用异丙醇置换。3lA检测VBA
4.流动相与样品在使用前可以用0.45um的微孔滤膜或用预处理柱(SPE固相萃取小柱)进行预处理,并严格脱气。3lA检测VBA
5.流动相pH需保持在2-8之间,请尽量不超过适用范围。3lA检测VBA
6.柱温不要大于60℃。3lA检测VBA
7.压力最高不超过30Mpa,建议在20Mpa以内使用。3lA检测VBA
8.使用新鲜溶剂,防止细菌增长。3lA检测VBA
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