液相色谱柱由柱管、压帽、卡套（密封环）、筛板（滤片）、接头、螺丝（封头）与柱填料等组成。DTE检测VBA
柱管：DTE检测VBA
多用不锈钢制成，若果使用时柱压不高于70 kg/cm2时，也可采用厚壁玻璃或石英管，管内壁要求有很高的光洁度。用于柱填料的装填。DTE检测VBA
压帽：DTE检测VBA
即色谱柱两端套合于柱管端外壁的塑性圆柱帽，中部有小孔，多为聚四氟乙烯制成，用于固定筛板。DTE检测VBA
密封环：DTE检测VBA
位于接头螺旋环内壁的弹性环，多为聚四氟乙烯制成，用于色谱柱两端压帽与柱外壁的密封。DTE检测VBA
色谱柱使用前注意事项。DTE检测VBA
色谱柱在使用前，最hao进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。DTE检测VBA
在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最jia条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。DTE检测VBA
但要注意：DTE检测VBA
柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同。DTE检测VBA
1、样品的前处理DTE检测VBA
a、最hao使用流动相溶解样品。DTE检测VBA
b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。DTE检测VBA
c、使用0.45μm或0.22?m的过滤膜过滤除去微粒杂质。DTE检测VBA
2、流动相的配制DTE检测VBA
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：DTE检测VBA
a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。DTE检测VBA
b、流动相与样品不产生化学反应DTE检测VBA
c、流动相的黏度要尽量小，以便得到好的分离效果；降低柱压降，延长泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。DTE检测VBA
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最hao使用对紫外吸收较低的溶剂配制。DTE检测VBA
e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。DTE检测VBA
f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。DTE检测VBA
除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。DTE检测VBA
3、流动相流速的选择DTE检测VBA
因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。DTE检测VBA
对于一根特定的色谱柱，要追求最jia柱效，最hao使用最jia流速。DTE检测VBA
对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml／min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml／min为佳。DTE检测VBA
当选用最jia流速时，分析时间可能延长。DTE检测VBA
可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量)。DTE检测VBA
注意：DTE检测VBA
a．含水流动相最hao在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最hao加入die氮化钠，防止细菌生长。DTE检测VBA
b．流动相要求使用0.45 μm或0.22m滤膜过滤，除去微粒杂质。DTE检测VBA
c．使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。DTE检测VBA
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标签: 液相色谱柱
液相色谱柱液相色谱柱的组成与使用_液相色谱柱
高效液相色谱使用常见问题
1.
色谱柱中的流动相会排干吗？
不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形：不慎未及时补充流动相，泵将溶剂瓶中的流动相吸干了，HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱？泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了？色谱柱还能使用吗？事实上，如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干，并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气，泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体，而不能输送空气。相比之下，另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样，整个色谱柱干涸的情况不太容易发生，多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了，因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了，也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面；已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润，恢复到正常状态。DTE检测VBA
2. 使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什么问题？DTE检测VBA
如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱，使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。PEEK管路容易连接；PEEK接头不仅无需工具，手拧即可固定，而且容易调节锥箍之外的管路长度，方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。DTE检测VBA
使用此类材料的管路需要注意的是：PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象，但PEEK遇到上述溶剂会变脆。另一个西药考虑的因素是压力限。不锈钢管可耐受6000psi的压力，但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi)。DTE检测VBA
使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能，因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管，因而压力太高时，可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。DTE检测VBA
3. 如何预防液相泵的故障:DTE检测VBA
要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:DTE检测VBA
1)、用高质量试剂和HPLC级溶剂；DTE检测VBA
2)、过滤流动相和溶剂；DTE检测VBA
3)、脱气；DTE检测VBA
4)、每天开始使用时放空排气，工作结束后从泵中洗去缓冲液；DTE检测VBA
5)、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中；DTE检测VBA
6)、定期更换垫圈；DTE检测VBA
7)、需要时加润滑油；DTE检测VBA
8)、查阅有关泵操作手册中的其它建议。DTE检测VBA
处于良好操作状态的泵，应该能使色谱图上的基线平稳；保留时间的重复性好。在等度洗脱时压力波动小于2%。梯度洗脱时压力变化应是缓慢和平稳的。DTE检测VBA
为了使故障发生后尽快排除，平时应常备密封、单向阀(入口与出口)、泵头装置、各式接头、保险丝等部件，以及更换工具。DTE检测VBA
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高效液相色谱高效液相色谱使用常见问题_高效液相色谱
