| 【客服微信qejc21】 液相色谱柱的使用注意事项：流动相和样品处理1. 色谱柱使用前注意事项：色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是 液相色谱柱的使用注意事项：流动相和样品处理1. 色谱柱使用前注意事项：PXw检测VBA 色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10％左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。PXw检测VBA PXw检测VBA PXw检测VBA 2. 流动相：PXw检测VBA PXw检测VBA 1）在进行样品检测前，至少使用20倍柱体积流动相使色谱柱充分平衡。流动相一定要使用色谱级别的溶剂。如使用水相的缓冲液应当天配制以保持新鲜避免细菌产生。PXw检测VBA PXw检测VBA 2）流动相使用前需用微孔滤膜过滤,消除流动相中颗粒对色谱系统和色谱柱的损坏。缓冲液与其他流动相混合后应重新过滤避免溶解度变化造成产生新的沉淀。不应使用纯水作为流动相冲洗C18色谱柱，以免柱性能损坏（添加5％的有机溶剂冲洗色谱柱，同时可以达到对缓冲盐清洗的作用。还可以使色谱柱更容易平衡）。PXw检测VBA PXw检测VBA 3）流动相需脱气后使用，可避免因气泡导致的泵和检测器的工作不正常。如果测试时使用的流动相与色谱柱保存使用的流动相有较大区别，应该使用过度分布的形式进行平衡。避免由于流动相的突然变化造成柱压增加过大或流动相缓冲盐结晶造成对色谱柱和仪器系统的损坏。正相色谱柱比反相色谱柱需要更长的平衡时间。PXw检测VBA PXw检测VBA 4）流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水*好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。PXw检测VBA PXw检测VBA 5）以常规硅胶为基质的键合相填料通常的PH值适用范围是2.0-8.0，BDSC18适合于碱性化合物，PH值适用范围为2.0-10.0。当必须要在PH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。PXw检测VBA PXw检测VBA 6）流动相PH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。一旦造成这种情况，很难恢复。PXw检测VBA PXw检测VBA 7）色谱柱由高压匀浆法装填，能承受较高压力。为获得*佳分离效果，使用时请不要超过200kgf，而且避免压力突然上升或变化，否则会造成硅胶填料的破坏，减少色谱柱的使用寿命。除特殊要求外*高操作温度不要超过60℃ PXw检测VBA PXw检测VBA 3. 样品：PXw检测VBA PXw检测VBA 1）样品应当尽可能溶解在能与流动相相互溶的溶剂中。除特殊指明外，如使用强溶剂溶解样品柱子的分辨率将可能降低。PXw检测VBA PXw检测VBA 2）样品溶液在进样前应使用针头式过滤器对样品预先过滤。频繁改变流动相组成，会加速降低柱效。PXw检测VBA PXw检测VBA 3）样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（SPE）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。PXw检测VBA PXw检测VBA
PXw检测VBA 日常中经常会遇到液相色谱仪使用过程中冒出气泡，一般是由于温度上升，压力下降造成的。PXw检测VBA 温度上升或柱温上升，当接近试剂沸点时，试剂汽化产生气泡，试剂中已含微小气泡，因加热变大而产生气泡。压力下降产生气泡，流动相中一直包含微小气泡，无论超声过滤，均不能池底去掉它，那么当压力下降时，微小气泡将长大，且多个小气泡易聚集成大气泡，而影响正常实验。PXw检测VBA 气泡产生原因分析处理：PXw检测VBA 1、泵头：泵头是压力变化最剧烈的地方，也是最易产生气泡的地方，泵头靠负压而吸液，而负压必然使流动相中的小气泡长大，当泵腔变正压时，已长大的气泡未必能全部变小流入后续液路，则泵腔内将积存气泡，从而影响吸液精度，鉴于此，泵头上专门设计了排气阀，便于泵头排气，观察柱压稳定了说明泵头排气成功。PXw检测VBA 2、吸液白管长气泡。PXw检测VBA a、吸液白管接触空气部位漏气，产生可见气泡，吸液白管是常压和负压交臂变化部位，其漏表现为大气进入白管内，而不易见到管内液体漏出。PXw检测VBA 处理方法：更换白管。PXw检测VBA b、滤头堵：滤头堵使得液体流入滤头的速度下降，泵强制吸液而产生真空气泡。PXw检测VBA 判断：拔掉滤头不再长气泡则是滤头堵。PXw检测VBA 处理：A、30%硝酸水液超洗滤头，20分钟左右。PXw检测VBA B、水超洗滤头，注意换水多超几次。PXw检测VBA c、流动相汽化产生气泡。PXw检测VBA 尤其是夏天室温高，沸点低的试剂易汽化，比如：乙酸，乙mi，氨水，石油醚等易于汽化。PXw检测VBA 处理：超声，降室温。PXw检测VBA PXw检测VBA 液相色谱速率理论方程式 在范第姆特方程模型基础上，根据液相色谱的特点作了某些修正，得到如下几种液相色谱速率理论方程式。 1、高效液相色谱速率理论方程式：PXw检测VBA PXw检测VBA PXw检测VBA 其中涡流扩散项：PXw检测VBA PXw检测VBA 分子扩散项：PXw检测VBA PXw检测VBA 传质阻力项：PXw检测VBA PXw检测VBA 其中包括：称为流动的流动相中传质阻力系数，称为滞留的流动相中的传质阻力系数，称为固定相中的传质阻力系数。 高效液相色谱速率理论方程详细表达式：PXw检测VBA PXw检测VBA PXw检测VBA 式中， dp——色谱柱填料平均粒径； df——固定相有效液膜厚度； U——流动相平均流速； Dm——组分分子在流动相中的扩散系数； Ds——组分分子在固定相中的扩散系数； wm——由色谱柱和填充的性质所决定的系数； ws——与容量因子k有关的系数； wsm——与颗粒微孔中被流动相所占据部分的分数以及容量因子k有关的系数。其余符号含义同前面。 从上式中可以看出，液相色谱和气象色谱的速率方程式基本一致，主要区别在于液相色谱中影响柱效的主要因素是传质阻力项，而份子扩散项对柱效的影响不像气相色谱那样明显。PXw检测VBA 2.吉丁斯修正速率理论方程式： 吉丁斯认为流动相流速对涡流扩散项影响较大，对范第姆特方程修正如下：PXw检测VBA PXw检测VBA 式中为涡流扩散项，相当于上式的含义。PXw检测VBA 标签: 液相色谱 液相色谱液相色谱速率理论方程式_液相色谱
|
